第十题,实验设计题。请同学们一篇材料。
核酸限制性内切酶是重组DNA技术中最重要的工具酶之一,它是一类能识别双链DNA中特定碱基序列,内切方式水解DNA链的核酸水解酶。最适合基因工程操作的限制内切酶为第二类内切酶,这类酶的一个重要特点是切割的断裂点都在反转重复序列上,亦称回文式序列,如:
Ebsp;I
5’-G↓AATT C-3’
3’-bsp;TTAA↑G-5’
BamH I
……
请设计一个质粒DNA的限制性内切酶酶解鉴定实验。
‘还好我做过核酸的其他实验,这个核酸限制性内切酶的实验设计,编吧!’
兰杰并没有亲手做过限制性内切酶的实验,他也很想做啊,然而限制内切酶是昂贵的生化试剂,教练不给他做。
这个时候,兰杰只能依靠类似实验的操作经历及丰富的理论知识储备,进行合理的编排。
第一步,酶切反应。
第二步,电泳凝胶板的制备。
第三步,电泳加样。
第四步,电泳与鉴定。
兰杰首先设计出四个主要的实验步骤。